发情鉴定发情初期，母牛兴奋不安其它母牛，但拒绝爬跨，阴户肿胀。黏液透明、不呈牵丝状、黏性强。发情盛期，母牛温顺，接受爬跨，阴户肿胀。黏液透明、量多、呈牵丝状、黏性强。发情末期，母牛拒绝爬跨，阴户肿胀减退，黏液半透明、黏稠、黏性差、牵丝较短。
输精时间母牛的人工授精适宜时间在发情末期。若上午发现母牛发情，下午牵牛到配种站输精；若下午发现母牛发情，第二日上午牵牛到配种站输精；若只进行一次输精，可在拒爬后8～12小时进行。母牛早上接受爬跨，下午输精一次，第二天补配一次；母牛下午接受爬跨，次日上下午各输精一次。
器械准备细管输精器、温度计各1支；镊子、细管专用剪各1把；指甲刀1把；盛水容器（胶盆、桶也可）1个；温水若干。 细管冻精解冻温水盛于容器中，用温度计测试水温达到40℃～42℃时，再用镊子从液氮罐中取出细管冻精放入40℃～42℃温水中直接浸泡晃动5秒，或者当细管内精液颜色改变时，立即取出。以细管冻精棉塞端为底部将细管插入输精器定位孔内，并用棉塞端把推杆抵向后退不动为止，再用专用剪剪去顶部封口，插进塑料外套管内置的密封带孔的胶塞内，向上推动外套固定在输精器双螺纹上，便可备用。
直肠把握输精操作掏出余粪。输精员将左手指甲剪短、锉磨，清洗手掌、手臂后并涂上肥皂水，再将手指并成锥形，缓慢旋转促入肛门，掏出直肠粪便。把握子宫颈。再将左手伸入肛门，手掌展开并掌心向下，按压抚摸，隔着直肠在骨盆底部能触摸到一个长圆形、质地较硬的棒状物，这就是子宫颈，将子宫颈后端轻轻固定在手中。输精。右手把输精器自阴门向斜上方插入5～10cm，以避开尿道口，再改为平插或斜下插，两手并相互配合以调整输精器方向，使输精器缓慢穿越子宫颈管的皱襞轮（一般为4个）进入子宫颈深部或子宫体，即可缓缓注入精液。然后，右手慢慢拉出输精器，左手从直肠中退出，此刻直肠把握输精操作完毕。