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山楂叶含量测定方法(金丝桃苷)

放大字体  缩小字体 发布日期:2008-12-06  来源:中国兽药114网  作者:蓝天  浏览次数:400

山楂叶为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge. var. major N.E.Br.或Crataegus pinnatifidaBge.的干燥叶,收载于2005版《中国药典》一部中。对其含量测定,2005版药典采用HPLC法测定金丝桃苷的含量;紫外分光光度法测定总黄酮的含量。文献报道的金丝桃苷的含量测定方法主要是采用高效液相色谱法,紫外分光光度法应用很少,一般为测定总黄酮的含量,现就HPLC法测定金丝桃苷的HPLC方法作一介绍。

⑴ 2005版药典山楂叶含量测定项:

色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-甲醇-四氢呋-0.5%冰醋酸溶液(1:1:19.4:78.6)为流动相;检测波长为363nm.理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于3000。

供试品溶液的制备:取本品细粉1g,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷加热回流提取至提取液无色,弃去三氯甲烷液,药渣挥去三氯甲烷,加甲醇继续提取至无色(约4小时),提取叶蒸干,3加稀乙醇溶解,转移至50ml量瓶中,加稀乙醇至刻度,摇匀,作为溶液。

⑵文献报道的高效液相色谱法

常用的实验仪器:Waters高效液相色谱仪(美国):510泵,2487紫外检测器;浙江大学色谱工作站;日本岛津LC-10AVP系列高效液相色谱仪,SPD-10A VP可见紫外检测器;UV-265FW 自记式分光光度计;PE200高技液相色谱仪,PELC-295紫外可见检测器;日本岛津LC-10Av高效液相色谱仪(包括在线脱气机、二元泵、SPD-M1OAVP二极管阵列检测器,CLASS-VP5.03软件)。

色谱柱:天津凯德ODS色谱柱(150mm×4.6 mm,5μm);Kromasil,KR100-5 Cl8(250mm×4.6mm,5μm);Inerteil ODS 2(250mm×4.6 mm,5μm);Intersil ODS-3C18柱(250mm×4.6mm,5μm)(GL Science Co.Ltd);:迪马公司DiamonsilC18分析柱(250mm×4.6 mm,5μm);流动相:);依利特Hy persil BDS Cl8 5μm(4.6×2OOmm)。

流动相:甲醇-磷酸水溶液;乙腈-冰醋酸;乙腈-四氢呋喃-水-甲酸;甲醇-磷酸-三乙胺;:乙腈-水-36%乙酸等系统。

检测波长:360nm、256(257)nm、358(361)nm、255nm等。

样品的处理:不同浓度的甲醇溶液、丙酮溶液、乙醇溶液提取,经微孔滤膜过滤即可。


 
 
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