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离子交换法提取胆红素

放大字体  缩小字体 发布日期:2007-01-15  来源:中国兽药114网  作者:浩天  浏览次数:416

摘要:胆红素的应用十分广泛,文章给出了用离子交换法提取胆红素的全过程,这种“生化”提取技术对于猪胆的利用有一定价值。
关键词:预热处理;吸附;酸化;再生处理
胆汁的碱液处理新鲜的优质猪胆用不锈钢刀切开,将收集到的胆汁用双层纱布过滤 除去杂质和油脂,将胆汁收集到瓷桶中。然后将2mol/L氢氧化钠溶液加入胆汁中(比例为每kg胆汁加碱液21m1)搅拌均匀后升温至96~98℃,保温2~3min,得到鲜红的胆红素溶液。
树脂的预热处理及离子交换柱的制作 离子交换树脂需预热处理,使体积膨胀,才有较大的吸附能力,方法是将树脂用80℃以上热水浸泡l~2h,然后仔细地把发胀的树脂均匀装入圆玻璃柱中(注意不能形成断层)。在交换柱中加入80℃ 以上热碱水,pH值在12左右,冲洗到柱中流出的液体的pH值在9.5以上为止。至此,离子交换柱装柱完毕。其树脂的用量与胆汁量的体积比为1:4.
吸附 将交换柱中碱水放干净,加入80℃以上的胆汁水进行吸附,3~5min后放出。如果流出的胆汁水颜色较深时,再重复吸附1~2次(重新吸附前需再加温至80℃)直至流出的胆汁水淡至无色
降温 吸附完全以后,在交换柱中加入冷水和亚硫酸氢钠(1k 胆汁加5~10g亚硫酸氢钠),洗至常温(夏天洗至常温,冬天洗至20℃)流出水的pH值为8左右。
酸化 在树脂柱中加入盐酸溶液进行酸化(盐酸溶液:lkg冷水加入36%左右浓盐酸21m1);用此盐酸溶液淋洗交换柱,直至流出液的pH值为1~2即可(1k 树脂约需1~2kg盐酸溶液)。
去杂用80%以上的酒精溶液反复淋洗交换柱,除去杂质,直至流出液的pH值为5~6.
氯仿脱附 除尽交换柱中的酒精后,加入氯仿,浸取3min后将氯仿放出,如此反复3次。
最后,加入少量酒精以便将树脂柱中氯仿全部放出。氯仿的用量约为树脂量的2倍。
回收氯仿提取胆红素,将三次脱附流出的氯仿溶液合并收集在烧瓶中,放在水浴锅内进行蒸馏,温度控制在65~75℃ ,直到氯仿被全部蒸出为止。氯仿蒸气经冷凝后回收(回收的氯仿可以重复使用)。然后打开瓶塞再蒸发5~10min.
将残留液收集在垫有定性滤纸的布氏漏斗中进行抽滤,再用酒精冲洗一次,将滤纸取出,然后放入烘箱中在6O℃下干燥2~3h,在滤纸上即产生结晶的胆红素产品。用竹片刮下后,收集在棕色玻璃瓶中,避光保存。
树脂的再生处理离子交换树脂在经过3~5次使用之后,需进行再生处理,使其恢复良好的吸附能力。处理的方法是:在树脂中加入盐酸酒精溶液(盐酸:酒精=1:10),溶液用量与树脂用量的比例为1:2,然后再用清水反复淋洗到pH值为7,即可使用。如果树脂使用得当,可反复使用2~3年。

 
 
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