为保证疫苗发挥应有的效用，必须使用合适的稀释液。一般弱毒(菌)疫苗用生理盐水稀释液，不能用凉开水稀释疫苗。
凉开水的理化性质决定了它不适合作为疫苗稀释液，因为弱毒苗的核心物质是它所含的弱毒细菌或弱毒病毒，它们都是活的微生物。在疫苗制作时，最大限度地为它们提供了适宜的营养物质和生存条件，以尽量保存和维持其存活。
凉开水不是等渗液体，低渗作用可直接对疫苗毒株的微生物产生不良的影响，尤其是一些细胞苗。低渗作用可加速细胞的崩溃和破坏，使其中的病毒颗粒暴露而降低了存活时间。凉开水的pH值及其所含的矿物质、杂质等都会加速疫苗失效。
在凉开水的制备和使用过程中，常因缺乏无菌知识或不慎造成事故。例如，某小型养猪场每年都按严格程序接种疫苗，从未发生过大的疫病。但2005年一批60多头育成猪突然发生典型性猪瘟，经仔细排查发现免疫失败是主要原因，操作人员为了杀菌，将曾装有凉开水的茶杯倒入百毒杀消毒液消毒，致使凉开水混入消毒液，用它稀释疫苗当然会使猪瘟疫苗失效。
