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Herdchek猪瘟抗体ELISA试剂盒在猪瘟控制中的应用

放大字体  缩小字体 发布日期:2009-04-15  来源:中国兽医杂志  作者:牛博  浏览次数:571

猪瘟的发生有多种多样的原因。在改善其生物安全管理措施的同时,选择质量良好的疫苗,使用合理的免疫程序以实现有效的免疫,使猪群获得均匀一致的抵抗力无疑是控制猪瘟目前最为可行的措施之一。

为实现有效免疫,必须从两个方面来着手,一是要选择最恰当的免疫时机,二是要确认免疫效果。如果发现免疫没有达到预期效果,则要检查免疫程序和管理措施,并及时进行补针。并根据抗体检测的情况,校正本场的免疫程序。

1 抗体监控 

抗体监控的主要目的是了解畜群血清抗体的消长情况,及时发现抗体的异常状况并采取应对措施,其重要的功能还在于帮助选择免疫时机和评估免疫效果。抗体监控公认的标准方法是病毒中和试验,因为中和抗体水平能够直接体现猪只对猪瘟病毒感染的抵抗力,虽然目前有一些报道表明不同的猪瘟分离株耐受中和抗体的能力有所不同,即有些毒株需要更高的中和抗体水平方可奏效,但对一个毒株而言,中和抗体水平与猪只的抵抗力是呈现明显的正相关性。

虽然中和抗体能够体现猪群抵抗力,但临床上用测定中和抗体的方法来监控免疫效果的农场并不多见,其主要原因是病毒中和试验操作起来非常困难,除了需要特别设施和技术人员配备、需要严格执行无菌操作以外,判断结果需要特殊的技术,因为猪〖CM(22〗瘟病毒一般不产生细胞病变,所以最后结果需要用荧光抗体或酶来染色才能观察到,如OIE所推荐的荧光抗体病毒中和试验(FAVN)和过氧化物酶联方法(NPLA),都需要操作者有一定的经验和技能才能保证良好的敏感性和特异性。此外,有些实验室会采用家兔体温测定或新城疫强化法来进行中和试验,但是也需要相当的经验和操作技能,另外其获得的效价与FAVN会有一些差别。无论采用何种方式进行中和试验,通常需要5~7天或者更长的时间。

因此,需要一种更为简便可行的、能够体现猪群的保护力的方法来进行免疫评估,而这正是IDEXX猪瘟抗体ELISA试剂盒的设计目的之一。该试剂盒采用的是阻断ELISA的模式,所采用的单抗是针对E2蛋白的单抗,其抗体与中和抗体具有很好的相关性,相关系数为0.863,所以是评估畜群抵抗力的良好手段。根据台湾中兴大学所进行的中和试验(新城疫强化法)和IDEXXELISA的对比试验表明,在一定的抗体区间内,ELISA的阻断率与中和抗体效价有明显的正相关关系,所以可以用阻断率的高低来估测猪只的保护性抗体水平(如表1所示)。

与其他血清学检测方法相比,该试剂盒具有操作简便、快速的特点,所有的成分均为即取即用试剂,检测样品为血清或血浆,有快速和过夜两种模式,快速模式3h内出结果。充分弥补了中和试验的不足之处。同时,该试剂盒具有良好的检测性能,能在感染后11天左右就可检测到血清学转化,其敏感度标准相当于或略低于1∶8的中和滴度,与BVDV和BDV均无交叉反应,具有良好的特异性。由于其严格的制造工艺,所以保证了其良好的批次间符合率和稳定性。

此外,ELISA也是OIE指定的国际间贸易所采用的3种检测方法之一(另外两种为FAVN和NPLA)。

2 疾病监控 

目前,任何农场都有自己的疾病免疫程序,饲养者都充分了解到免疫对于疾病控制的重要性,但能够定期检测抗体,也就是说建立规范的疾病监控程序的却只有一些管理良好的大型猪场,也就是说,为数不少的免疫事实上是盲目免疫,轻者仅仅是疫苗浪费和增加成本,重者甚至可以造成疾病暴发。所以,疾病监控程序与免疫程序一样,也具有非常重要的作用,需要饲养者充分地进行认识和严格的执行。

建立猪瘟抗体监控程序要充分了解本场的饲养管理情况和免疫程序等因素,不同的农场应建立适合自己的监控程序,但要注意采用正确的采样方法和样品数量,同时还要保证一定的频率,如表2举例所示。

表2 猪瘟抗体监控计划示例

种类 时间 目的

经产母猪 至少每半年1次 评估母猪群的健康状态和抵抗力,并预测仔猪的母源抗体

水平

后备母猪 在转群前 保证其健康状态和抗体水平

仔猪 1日龄到7日龄 母源抗体水平

14日龄 母源抗体水平

28日龄 母源抗体水平

42日龄 母源抗体水平

商品猪群 免疫后6~8周 监控免疫效果

对于猪瘟的问题猪场,除加强生物安全方面的管理减轻其感染压力的同时,应通过ELISA检测来检查其疫苗质量和免疫程序,不断改善猪只的抗体状况,在阳性率、阻断率和变异率3个方面进行提高,最终达到控制猪瘟的目的。

对于管理良好的猪场,由于选用固定的疫苗和免疫程序,加上ELISA试剂盒良好的重复性和稳定性,其猪群的抗体应当有一定的规律可循,也就是有一个基准线。抗体一旦偏离这个基准线,如大幅度升高或降低,都会提示兽医人员去检查其免疫状况和野毒感染状况,及早采取措施。

3 结语 

猪瘟是可以被控制和根除的,但猪瘟的控制是一个系统的复杂的工程,免疫预防是目前猪瘟流行地区如亚洲控制猪瘟的主要手段,在使用疫苗的同时,应选择良好的检测手段、建立和执行疾病(抗体)监控程序来优化免疫程序和确保免疫效果,才能最终达到控制猪瘟的效果。IDEXX猪瘟ELISA抗体检测试剂盒与中和抗体紧密相关,是进行抗体监控的良好方法。


 
 
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