1 发病情况
铁力市某镇一养兔场，饲养哈白、比利时、加里弗尼亚等肉种兔160只，存栏幼兔、青年兔1800多只，已接种兔瘟/巴氏杆菌病二联苗（据了解疫苗已过期）。2007年9月20日从外地购入8只种公兔进场时未进行检疫和隔离观察，即放入兔群中饲养。到9月29日，有5只断奶幼兔和4只青年兔死亡。次日早晨发现全群兔有半数以上发病，死亡大小兔789只，死亡率达40.2%，以2月龄左右的幼兔死亡率最高。发病后采用氟哌酸、土霉素、磺胺二甲嘧啶、庆大霉素等口服、注射等治疗，均不见效，病情还在不断蔓延，死亡兔在增加，未能控制住病情。据现场了解，所使用的兔瘟/巴氏杆菌病二联苗，是从外地药贩子手中低于市场价买的疫苗，细看疫苗瓶标签上的有效期已涂改，已过期1年零3个月。饲喂的粗饲料是经过一夏天的豆皮（北方称豆吻子），已明显变黑发霉。
2 临床症状
最急性的病兔突然发病，没有明显的症状，在发病后10～12小时体温升高达41.0℃，有的死前还在吃食，突然抽搐，惨叫几声即刻死亡。病程稍长的表现精神沉郁，食欲不振或拒食，饮欲增加，被毛粗乱无光泽。呼吸急促。从鼻腔中流出浆液性或黏液性鼻液，鼻黏膜苍白或发绀，并伴有眼角膜浑浊或溃疡。临死前常表现短期兴奋、争扎、狂奔、咬笼具，继而出现前肢俯卧，后肢支起震颤，倒地抽搐，四肢不断划动，角弓反张，尖叫而死。有少数病死兔鼻腔流出带有泡沫样血液。
3 病理变化
共剖检16只病死兔，其中幼兔5只，青年兔6只，成年兔5只，病理变化基本一致。病死兔鼻腔、喉头和支气管黏膜严重瘀血、出血，尤其是气管环最为显著呈弥漫性出血，在气管和支气管腔内存有大量的淡红色泡沫状液体，呈现红气管外观。在肺脏表面有圆形小结节，胸膜下和肺组织内可见到黄色或灰色结节，结节内容物呈黄色干酪样，互相融合呈不规则锯齿状坏死灶。肺水肿、膨胀、严重出血，有针尖大至绿豆粒大的出血点，呈花肝肺外观，切开肺组织流出多量红色泡沫状液体。心脏扩张，心包水肿，心内外膜有出血点。肝脏出、瘀血，肿大，有出血点和出血斑，表面有灰白色坏死灶，质地脆弱。胆囊肿大，胆汁充盈。脾瘀血、肿大，颜色变深，呈紫红色，质脆。肾脏瘀血、肿大，肾外膜有少量出血点。胃黏膜瘀血，呈暗红色，有的脱落，表面有小的暗红色出血点。肠系膜淋巴结肿大，有针尖大出血点。膀胱积尿，点状出血，脑膜小血管扩张。
4 实验室检查
4．1巴氏杆菌检查
4．1．1涂片镜检 采取病死兔的肝、脾和心血涂片，革兰氏染色，镜检，发现有两极着色的革兰氏阴性杆菌。
4．1．2细菌分离培养 无菌采取病死兔肝、脾组织，接种于鲜血琼脂培养基上，置于37℃恒温箱内培养24小时，生长出灰白色露珠状半透明、湿润、表面光滑、边缘整齐的小菌落，不溶血。取培养基上的菌落染色、镜检，则为革兰氏阴性两端钝圆、无荚膜、单个或成对排列的小杆菌。
4．1．3生化试验 将分离到菌珠的纯培养物接种于生化试验培养基上，结果该菌能发酵葡萄糖、果糖，产酸不产气；发酵乳糖、鼠李糖、山梨醇和水杨素，甲基红和V-P试验（+），尿素酶试验（-）；靛基质试验、接触酶、硫化氢试验（+）；不液化明胶。
4．1．4动物试验 采集病死兔的肝、脾组织研碎，用生理盐水制成1︰10的乳剂，静止后取上清液0.2毫升，接种3只小白鼠作试验，另取3只注射生理盐水作对照，在20～32小时内试验组小白鼠死亡，采集心血涂片进行检查，其形态与培养特性都和自然病例分离到的细菌相同，对照组存活。
4．1．5药敏试验 挑取典型菌落均匀涂于鲜血琼脂平板上，用多种抗菌药物纸片做抑菌试验，结果该菌对头孢噻呋、氟苯尼考高敏，对氧氟沙星、强力霉素中敏，对庆大霉素、土霉素低敏。
4．2曲霉菌检查
4．2．1曲霉菌紫外线检查 取玉米、麦麸、豆饼、豆皮各20克，置于紫外线灯下幅射，在豆皮上发出黄绿色荧光，而玉米、麦麸、豆饼上则没有，可认定豆皮含霉菌。
4．2．2压片镜检 取病死兔肺部的结节病灶和气管的分泌物，置于载玻片上，压碎，滴加10%苛性钾溶液，加盖玻片，轻压一下，在低倍镜下检查，可见到典型的霉菌菌丝和分生孢子。
4．2．3霉菌分离培养 以无菌操作取病死兔的肺、肝组织病变结节内的干酪物，接种于沙堡劳氏琼脂培养基上，置于37℃恒温箱内培养，接种后3天内，逐日进行观察，菌落最初为白色绒毛状，后变蓝色、棕色，2～3天取培养物镜检，可见到孢子和菌丝。
4．2．4饲料检查 取饲料玉米、麦麸、豆饼、豆皮各2克，放于沙堡劳氏琼脂培养基上，置于37℃恒温箱培养，而后进行霉菌检查，玉米、麦麸、豆饼呈（-），而豆皮呈（+），说明豆皮被霉菌污染。
4．3病毒分离与鉴定
4．3．1无菌采取病死兔的肝、脾、肾病变组织，研碎，按1︰10加入生理盐水制成乳剂，然后用双抗处理30分钟，3000转/分钟，离心15分钟取出上清液作被检病料备用。
4．3．2回归试验 取被检病料按1毫升/千克体重，给3只体重为1～1.5千克的未免疫健康兔皮下注射，结果3只兔分别在32、40、48小时死亡，并出现兔病毒性出血症的临床症状和病理变化 。
4．3．3血凝（HA）试验 取被检病料用生理盐水作1︰10稀释，然后按2倍连续递进稀释成为1︰20、1︰40～1︰1280、1︰2560，充分摇均，同时设置生理盐水对照，每管分别加入人O型红细胞悬液进行微量血凝试验，室温下作用30分钟，结果出现凝集反应，凝集效价均在1︰1280以上，而生理盐水对照组未出现凝集反应。
4．3．4血凝抑制（HI）试验 取被检病料等量，加入稀释的已知兔病毒性出血症病毒阳性血清，摇均，再加入1%的人O型血红细胞悬液，未发生凝集反应，表明被检病料中存在兔病毒性出血症病毒。
5 防治措施
5．1立即停喂发霉的豆皮饲料，换上新鲜饲料。彻底清除舍内的粪便、垃圾和污物，笼具用火焰喷射消毒，地面、墙壁用3%的火碱消毒，用具刷洗干净，每天用0.2%的过氧乙酸带兔消毒1次。并对病兔进行隔离饲养和治疗。
5．2对未出现症状的假定健康兔，注射兔病毒性出血症/巴氏杆菌病二联灭活苗，1月龄以上兔皮下注射2毫升，乳兔和幼兔注射1毫升；出现症状的用兔病毒性出血症高免血清治疗，成年兔肌肉注射3毫升，幼兔2毫升，连用2天。
5．3发病兔肌肉注射头孢王（含头孢噻呋、氟苯尼考、增效剂等）0.1/千克体重，1次/日，连用3～5天。用复方氟苯尼考50克拌料100千克，3次/日，连喂3～5天。
5．4制霉菌素口服，5万单位/只，2次/日，连用5～7天；灌服1︰3000的硫酸铜溶液，10～20毫升，2次/日，连用3～5天，也可作饮水用。
5．5对种兔可用10%的葡萄糖溶液20毫升、VB15毫升，皮下分点注射；再用葡萄糖15克、VC30毫克、VK2毫克、肝乐100毫克、肌醇12.5毫克，加少量水混合后口服，1次/日，连用5～7天。
5．6有鼻炎和打喷嚏的病兔，可用生理盐水稀释链霉素（2万单位/毫升）进行滴鼻，2次/日，连用3～5天。
5．7在饮水中添加5%的葡萄糖、0.1%VC、VK3和黄芪多糖；饲料中加入3%的红酒酵母多糖，连用10天。可增强兔的抗病能力，有利于病兔恢复。
经采取上述综合治疗措施，5天后死亡减少，在治疗过程中淘汰26只没有治疗价值的病兔，10天后基本控制了疫情，再未发病。 （ 杨成勇 黑龙江省铁力市畜牧兽医局，黑龙江铁力152500）
