鸡传染性脑脊髓炎的诊断
初步的诊断
根据雏禽出壳后陆续出现瘫痪、早期食欲尚好、剖检无明显的特征性肉眼变化，追踪到其种鸡有短暂的产蛋下降，且某段时间内孵出的多批小鸡需分发到不同地方饲养，但均出现麻痹、震颤和死亡等情况，结合组织病理学特征性变化，即可作出初步的诊断。确诊应进行实验室诊断。
病原的分离与鉴定
1．病原的分离采多只出现典型症状的小鸡脑组织混合，按常规方法制备脑组织悬液，脑内接种1日龄无AE母源抗体或SPF雏鸡，每只接种0.03ml，接种后1～4周龄内出现典型的症状。收集有典型症状的病鸡的脑、胰腺作继代用的种毒。也可将病料通过卵黄囊途径接种5～7日的易感鸡胚，接种后12天检查部分鸡胚是否有胚胎萎缩、爪卷曲、肌营养不良等特征性变化，但野外分离病毒常不能使SPF鸡胚产生病变，需盲传3～4代，才能适应鸡胚产生病变。其余让其孵化至出雏，出壳后10天内便可见AE的症状出现，此时，取其病雏的脑、腺胃、胰腺等作病理组织学的检查。
2.病原的鉴定 病毒的检查可用荧光抗体技术(FA)，直接从病鸡的脑、胰腺和腺胃中检出AE病毒抗原。其方法是将病料制成6～7µm厚的冷冻切片，固定于载玻片上．空气干燥；用4℃丙酮固定10min，倾去丙酮液，空气干燥；用抗AEV的特异性荧光抗体于室温染色30min，经pH7.4的磷酸盐缓冲盐水冲洗20min，然后加盖玻片，并用pH7.4的缓冲甘油封片。在荧光显微镜下检查，阳性鸡的组织中可见黄绿色的荧光。此时，还可用琼脂扩散疑集试验(AGP)，将病料接种SPF鸡或鸡胚，取发病鸡或鸡胚的脑、胃肠和胰等制备待检琼扩抗原，用已知AE阳性血清检查病毒的存在。
血清学诊断
1．病毒中和试验(VN) 将VR株10倍系列稀释的病毒液0．5ml中加等量的5倍稀释的被检血清，置37℃作用60min后，各取约0．2ml，接种于SPF鸡胚的卵黄囊内，置37℃孵育观察，至18日胚龄时，观察鸡胚的特征性病变，计算EID50。从病毒对照的 EID50减去上述的EID50值的对数差异计算中和指数，中和指数在1.0以上，视为抗体阳性。
2．鸡胚敏感试验 经蛋黄囊途径对6日龄的鸡胚接种100EID50/0.1ml的AE鸡胚适应株，接种后观察12天，检查鸡胚有无特征性病变，如果100％鸡胚有病变，种鸡被认为易感的，50％以下有病变表明鸡群有免疫力，中间数表明鸡群免疫不全或有近期的感染。
3．琼脂扩散凝集试验(AGP) 利用AE-VR鸡胚适应株或分离的野毒株分别接种 SPF鸡胚，收集发病胚的脑、胃肠和胰腺制成琼脂扩散抗原。在含20％NaCl和0.5％苯酚的0.8％琼脂凝胶中，用这种抗原进行AGP试验检测AE抗体，结果稳定，特异性强，方法简便迅速。
4．酶联免疫吸附试验(ELISA) 此法已广泛被国外采用于评价母鸡AE抗体的水平或作免疫效果的监测。美国IDEXX公司有商品化的试剂盒面市。此法与VN有良好的可比性，能定量检测血清中的AE抗体水平，加上每次可同时检测大量的血清样品，并容易将结果输入计算机软件程序中进行处理，因此，适用于禽场进行AE抗体的快速检测和评价AE抗体水平。其ELISA滴度用ET表示，同时用协同变异百分率(CV)表示群体内抗体的整齐度。
此外，还有间接免疫荧光和被动血凝抑制试验检测鸡血清中AE抗体的报道。
