宋珏琳贺月林曾艳
湖南省微生物研究所
一、材料
培养基 麦康凯培养基、三糖铁培养基、伊红美兰琼脂培养基。
指示剂 甲基红指示剂、甲萘酚指示剂。
受试药物复方穿琥宁注射液，每毫升含穿琥宁20毫克和硫酸小檗碱20毫克。由湖南省微生物研究所兽药研究室配制，批号20060312。
对照药物硫酸黄连素注射液(20毫克/毫升)，批号20060201。
受试动物断乳仔猪，长白二元杂交，湖南省微生物研究所实验场提供。共50头，体重约10千克，每天定时饮水，饲喂不含任何抗菌药物的自配全价料。
菌种及血清型大肠杆菌标准菌种K88、K99，大肠杆菌0101标准血清，均从中国兽药监察所购买。
二、试验方法
（一）人工感染大肠杆菌治疗试验
动物分组及给药将试验猪随机分成5组，各组隔离饲养。第1组为感染不治疗对照组，第3组、第4组、第5组为感染后肩部肌注复方穿琥宁注射液治疗组，剂量分别为0.5毫升/10千克（低剂量组）、1.0毫升/10千克（中剂量组）、2毫升/10千克（高剂量组），每天2次，3天一疗程。第2组肩部注射硫酸黄连素注射液进行治疗（每天2次，3天为一疗程），剂量为2毫克/千克，分组前用无菌棉签在直肠采样，进行细菌分离培养，用大肠杆菌标准血清0101做凝集试验，以确认无大肠杆菌感染。
细菌人工感染将临床分离的大肠杆菌0101培养肉汤（含菌量为8.0亿/毫升）按每只猪40毫升灌服，进行人工接种。接种后24小时用无菌棉签在直肠采集粪便以判断有无感染力，治疗结束后，采集粪便检查有无0101大肠杆菌。
治疗情况出现拉稀，精神萎顿后连续用药治疗3天，治疗结束后继续观察5天。治疗时每天用无菌棉签采集粪便，结束后1天再采集一次，作接种细菌分离培养，进行大肠杆菌0101血清玻片凝集试验。试验期间观察猪只有无异常行为及其它变化。试验过程中如有猪只死亡，应立即剖解，并进行细菌分离培养鉴定。
疗效判断治愈：用药3天后，腹泻症状消失，粪便成形，精神食欲恢复；显效：经3天治疗后，腹泻停止，但粪便较稀，精神饮食不佳；无效：经3天治疗后，腹泻未停止，程度加重，精神萎靡不振，食饮欲基本废绝。
试验结果用大肠杆菌标准血清型做玻片凝集试验，在试验前确认无大肠杆菌0101感染，人工接种24小时采集粪便中应均存在大肠杆菌0101，表明感染成功。此时观察到猪精神萎顿、饮欲正常、食欲不佳，有些猪开始拉稀，但无水样腹泻。
接种36小时后大约有50%的猪出现腹泻，粪便大多水样，含有未消化颗粒饲料。48小时后全部接种猪出现腹泻，但严重程度不一，约有60%的猪粪便有粘液或泡沫，此时开始用药治疗。各用药组猪症状均有不同程度的好转，其中4、5组90%的猪只治愈，第2组、3组仍有个别猪未治愈，但有一定疗效；第1组感染不治疗组症状不断加重。试验结果见下表。
（二）自然感染大肠杆菌治疗试验
发病情况 2007年4月29日，湖南省宁乡县六渡庵村丁某饲养的2头母猪分别于4月22日、24日产下仔猪10头和13头。于4月27日下午发现个别仔猪拉黄色稀粪，第二天拉稀加重，50%的仔猪拉黄白色稀粪。多数仔猪表现为被毛粗乱，无神爱睡，肛门粘有黄色粪便，腥臭，有的夹有泡沫。4月29日早上死亡仔猪1头，仔猪体温正常，剖解可见肠道、小肠（尤为十二指肠）呈急性卡它性炎症，肠系膜淋巴结肿大，充血、多汁，脾脏肿大。初步确诊为仔猪黄白痢。
病原分离鉴别随机采取死亡猪肠道内容物及粪便分别进行涂片，染色镜检和培养分离，并用大肠杆菌0型血清做凝集试验，并用分离培养菌做动物接种试验，确诊仔猪黄白痢为大肠杆菌感染所致。
治疗方法仔猪肌肉注射复方穿琥宁注射液（0.1毫升/千克）+樟脑磺酸钠（1毫克/千克，分开注射），每天2次，连用3天；母猪注射头孢噻呋钠0.5克/头（用生理盐水10毫升溶解）+樟脑磺酸钠（100毫克/头，分开注射），每天1次，连用3天。
实验结果 共治疗仔猪23头，治愈率95%，有效率为100%。确诊为黄痢的占60%，白痢占35%；未定的占5%。冶疗情况：用药2天治愈18头，用药3天治愈22头，未愈仔猪继续用复方穿琥宁注射液治疗1天后痊愈。
三、小结
1.复方穿琥宁注射液以0.1~0.2毫升/千克的剂量注射，2次/天，连用3天，能很好的控制猪大肠杆菌引起的肠炎腹泻，并且安全，治愈率高。
2．高剂量给药治疗组与中剂量给药治疗组相比，疗效差异不显著。
3．药物对照组、低剂量组疗效比中剂量组（0.1毫升/千克）差，并且差异很显著。因此推荐本品的常用量为0.1毫克/千克体重，2次/天，连用3天。
