摘要 目的：对黄芪地上部分有效成分进行研究。方法：采用紫外分光光度法，对黄芪茎和花中的总黄酮、总皂苷和多糖进行含量测定。结果：测得茎中总黄酮含量为1.621mg／g，总皂苷含量为1.768mg／g，多糖含量为12.057mg／g，花中总黄酮含量为4.389mg／g，总皂苷含量为21.842mg／g，多糖含量为11.213mg／g。结论：黄芪地上部分有一定利用价值。
关键词：膜荚黄芪；地上部分；黄酮；皂苷；多糖
Study on the effective componnts in the overground organ of membranaceus
Zhu Zhenglan，et a1．
Abstract Objective：Study on the effective components in the overground organ of membranaceus．Method Using UV-Vis spectrophotometer，determine the content of gross flavone、gross saponin and polysaccharide from stem and flower of Astragalus membranaceus(Fisch)．Bge．Result In the stem，the content of gross flavone is 1.621mg／g．gross saponin is 21.842mg／g，polysaccharide is 11.213 mg／g．Conclusion There are some value in the overground organ in membtanaceus．
Key words Astragalus mernbranaceus(Fisch)Bge；overground；flavone；saponin；polysaccharide．
黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch．)Bge．var．mongholicus(Bge．)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch．)Bge．的干燥根。黄芪是传统的补益中药，具有补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈俎难溃，久溃不敛，血虚萎黄，内热消渴；慢性肾炎蛋白尿，糖尿病n 。随着世界医疗事业的发展，补气药的需求大增，而黄芪为补气药中的一味重要品种，黄芪地上部分的前景看好，本实验以产于黑龙江省虎林的东北膜荚黄芪地上部分为研究对象，利用紫外一可见分光光度计对黄芪茎和花中的总黄酮、总皂苷和多糖进行含量测定 ，为开发黄芪地上部分，扩大药用资源提供科学依据。
1 仪器、试药与样品
UV-2102C型紫外可见分光光度计：尤尼柯(上海)仪器有限公司；化学试剂均为分析纯。黄芪甲苷标准品：购自中国药品生物制品检验所；芦丁标准品：购自中国药品生物制品检验所；样品黄芪采自黑龙江省虎林黄芪种植基地，经中药鉴定室沈志滨副教授鉴定为膜荚黄芪。
2 试验方法与结果
2．1 黄芪茎、花的有效成分提取。精密称取于6O℃干燥至恒重的黄芪茎、花粗粉各5g，先用500ml石油醚脱脂，回收石油醚，待溶剂挥干后，将残渣加入2O倍量的7O%乙醇，回流2.5h，过滤，得滤液A，放置备用。将药渣中加入2O倍量的水，沸水浴提取2.5h，过滤，将滤液浓缩得粗多糖溶液。将滤液A中的乙醇回收，得溶液B，将此溶液中两次加入1%活性炭脱色，再用水饱和的乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯层和水层。将乙酸乙酯层中的乙酸乙酯回收，得总黄酮。将水层用水饱和的正丁醇萃取3次，减压回收正丁醇，得总皂苷。
2．2 溶液的制备
2．2．1 芦丁标准溶液的制备 精密称取120℃下干燥至恒重的芦丁标准品9．20mg用3O%的乙醇定容于lOOml容量瓶中，摇匀，备用。
2．2．2 黄芪甲苷标准溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芪甲苷标准品4.6mg，置于干燥的10ml容量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
2．2．3 葡萄糖标准溶液的制备 精密称取105℃下干燥至恒重的葡萄糖标准品100mg，置于lOOml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，备用。
2．2．4 样品溶液的制备
将东北膜荚黄芪茎、叶粉碎，过2O目筛。于6O℃下干燥至恒重，分别精密称取上述粗粉5克，按“2．1”项下的方法制备样品溶液。皂苷类用无水乙醇定容于10ml容量瓶中；黄酮类用3O 的乙醇定容于25ml容量瓶中；多糖类用蒸馏水定容于25ml容量瓶中，摇匀，备用。
2．3 标准曲线的绘制
2．3．1 芦丁标准曲线的绘制
精密量取上述芦丁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.Om1分别至10ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀放置6分钟，加入1O%硝酸铝溶液0.3ml，放置6分钟，加入1N(4%)氢氧化钠溶液4ml，分别用3O%的乙醇定容，放置15分钟，置比色皿中，在510nm 波长处测定吸光度。数据经回归处理得回归方程为：A=11.407C+0.0008，r=0.99995。
2．3．2 黄芪甲苷标准曲线的绘制
精密吸取上述溶液0.15、0.30、0.45、0.60、0.75m1分别注入具塞试管中，分别加入无水乙醇至0.75ml，再分别加入0.75ml 8%的香草醛-浓硫酸试剂，置于冰浴中加入7.5ml体积分数为72%的硫酸摇匀，放入62℃的恒温水浴中保温20分钟，取出、流水冷却5min，摇匀。在30分钟内，于波长544nm处测定吸光度，随行空白。 ∞。数据经回归处理得回归方程为：A=23.098C-0.0065，r=0.99955。
2．3．3 葡萄糖标准曲线的绘制
精密吸取上述溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml置于50ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀。精密吸取上述各溶液2ml于试管中，分别加入5%苯酚溶液1.0ml，摇匀，迅速加入5ml的浓硫酸，振摇5分钟，置沸水浴中加热15分钟，然后置冷水浴中冷却30分钟，随行空白。在490nm处测定吸光度。数据经回归处理后的回归方程为：A=12.886×C+0.0015，r=0.9997。
2．4 黄芪茎总成分的含量测定
2．4．1 总黄酮的含量测定
精密吸取黄酮提取溶液0.5ml、0.7ml于10ml容量瓶中，按标准曲线法操作，根据回归方程测其含量，得1.621mg／g。
2．4．2 皂苷的含量测定
精密吸取皂苷提取溶液0.5ml于lOml容量瓶中，按标准曲线法操作，根据回归方程测其含量，得1.768mg／g。
2．4．3 多糖的含量测定
精密吸取多糖提取溶液0.1ml、0.2ml于lOml容量瓶中，按标准曲线法操作，根据回归方程测其含量，得12.057mg／g。
2．5 黄芪花总成分的含量测定
2．5．1 总黄酮的含量测定
精密吸取黄酮提取溶液0.5ml、0.7ml于10ml容量瓶中，按标准曲线法操作，根据回归方程测其含量，得4.389mg／g。
2．5．2 皂苷的含量测定
精密吸取皂苷提取溶液0.5ml于10ml容量瓶中，按标准曲线法操作，根据回归方程测其含量，得21.842mg／g。
2．5．3 多糖的含量测定
精密吸取多糖提取溶液0.5ml、1.0ml于lOml容量瓶中，按标准曲线法操作，根据回归方程测其含量，得11.213mg／g。
2．6 精密度试验
取黄芪茎的粉末，按“2．1 2．2．4”项下制备5份总黄酮样品溶液，5份总皂苷样品溶液，5份多糖样品溶液。精密移取各总黄酮样品溶液0.5ml，按“2．3．1”项下测定吸收度，以吸收度计算，RSD为2.45%。精密移取各总皂苷样品溶液0.5ml，按“2．3．2”项下测定吸收度，以吸收度计算，RSD为3.51%。精密移取各多糖样品溶液0.5ml，按“2．3．3”项下测定吸收度，以吸收度计算，RSD为2.96%。
2．7 稳定性试验
取总黄酮供试液，每15分钟测一次吸收度，连续2h考察其稳定性，结果表明2h内显色均稳定，可进行含量测定。取总皂苷供试液，每10分钟测一次吸收度，连续1h考察其稳定性，结果表明1h内显色均稳定，可进行含量测定。取多糖供试液，每10分钟测一次吸收度，连续1h考察其稳定性，结果表明1h内显色均稳定，可进行含量测定。
2．8 回收率测定
精密称取黄芪茎粉末0.5g，精密加入一定量的芦丁标准品、黄芪甲苷、葡萄糖标准品，按样品溶液的制备和含量测定方法，测定回收率，测定结果：芦丁平均回收率为95.2%，RSD=2.56%(n=5)；黄芪甲苷平均回收率为92.8%，RSD=3.56％(n=5)；葡萄糖平均回收率为98.9%，RSD=2.13%(n=5)。
3 讨论
黄芪多糖的组成十分复杂，目前最常用的糖含量测定方法使葸酮-硫酸比色法和苯酚-硫酸比色法。但在实际工作中，特别是在测定天然产物中的糖含量时，发现测得的结果常常与实际情况不符。原因是这两种方法都是以葡萄糖作为标准对照，这对含有多种单糖的天然多糖来说必将使测定值与实际含量不符。这是在糖含量测定方法的研究中常常遇到的问题 。如果在制作标准曲线时能够根据多糖的组成，用多种单糖适当混合后作为标准对照，就可以在一定程度上改善这种情况。
由实验结果可知，黄芪花中各种有效成分的含量高于茎，可能与采收期有关。
