摘要：本文综述了蛋黄抗体的来源、特性，IgG和IgY的区别，提取制备方法，精制IgY和粗制IgY的区别，以及蛋黄抗体在医学和兽医临床及其它领域的应用概况。旨在为更好的利用家禽作为生物反应器，研究、生产与推广蛋黄抗体提供思路。
蛋黄抗体（Egg yolk antibodies,eyAb）是指蛋黄中存在的抗体，也称蛋黄免疫球蛋白（Egg yolk immunogbulins, eylg），LeslieandB.ClemIgy（1969）提出以IgY表示。近十几年来，国内外学者就卵黄抗体的研究和开发作了许多工作，证明了免疫鸡的蛋是提供特异性IgG抗体最方便、最廉价的来源。
Jcnscncus等（1981）报道认为，一只母鸡在一个月中生产制备的卵黄抗体相当于500ml血清抗体。Bar-Joseph（1980）实验证明每ml卵黄含有3-25mgIgG，也就是说每个蛋可提供40-500mgIgG。Losch（1986）证明了yIgG和卵黄抗体对酸和温度具有一定抵抗力。当卵黄抗体1∶20稀释与0.1mol/1HCl作用2h，IgG浓度减少40%，抗体效价从log29降到log26。当与1mol/1HCl作用30min时，IgG活性降到log21；作用60min，IgG活性才完全消失。试验还证明将卵黄置于沸水中煮10min，yIgG和卵黄抗体活性降为零，煮6min几乎对卵黄中心的yIgG和卵黄抗体没有影响。
禽鸟类 IgY 与哺乳动物 IgG在科研实验的使用上没有明显的差别，而且禽鸟类 IgY还有它的一些优点，如与哺乳动物 IgG没有交叉反应；不与风湿因子反应，可降低免疫化验中的假阳性率；也不激活哺乳动物的补体；有良好的热稳定性。在蛋黄抗体的萃提精制过程中，国际通用的蛋黄抗体低温乙醇法、盐析法或层析法等蛋白质分离工艺无法解决“既要保证抗体生化结构的完整，生物活性的良好存在，又要彻底去除垂直传播病原”的难题，但有学者采用综合了物理、化学、生物等多种灭活技术，并结合酸化法、高速离心、超过滤等现代生物技术的HOF灭活工艺，成功提取、纯化制备注射用精制蛋黄抗体，且显示出（1）安全，不具备垂直传播病原的危险、不产生应激反应、对注射部位没有刺激；（2）不损伤免疫系统，无免疫抑制；（3）使用方便，易于保存（可常温保存和低温保存）；（4）注射后3－6h，抗体即被吸收入血，开始发挥效能等粗制抗体所不具有的优点。精制鸡传染性法氏囊蛋黄抗体已经获得国家二类新兽药证书，精制鸭病毒性肝炎抗体、精制小鹅瘟蛋黄抗体正在申报新兽药证书。中国兽药114网
IgY在医学免疫诊断与疾病治疗方面的应用十分广泛。由于IgY不激活补体、不结合类风湿因子、不与蛋白A、蛋白G、哺乳动物Fc受体和补体结合，与IgG几无交叉反应，作为免疫学实验检测工具，用于测定循环复合物、类风湿因子和补体等，减少假阳性，可用于多种特异性病毒学与细菌学等免疫学检测。有学者证实IgY预防轮状病毒引起的腹泻、龋齿与蛀牙，M6P/IGFII-R抗体与一种肿瘤干扰基因有关，IgY—RA生物导弹与中药相结合，形成抗癌药物，对消化道恶性肿瘤总有效率达７６％。傅颖媛等证实应用抗白色念珠菌特异性IgY，对提高大鼠免疫功能，特异性预防白色念珠菌感染具有明显的作用。IgY在兽医临床和水产方面也有广泛的应用，预防和治疗大肠杆菌引起仔猪黄痢、白痢、水肿病，有效率高达90%以上； 对小牛致死性伤寒沙门氏菌感染、仔猪与犊牛轮状病毒性腹泻有明显成效；使用卵黄抗体添加剂的试验组比对照组分别提高23.7%、11.4%和10.0%，说明了卵黄抗体添加剂明显促进断奶仔猪的增重和饲料转化；范玉芳等制备抗传染性法氏囊病卵黄抗体注射后12h鸡体内开始有抗体，并在体内维持5～7d，第8d全部转阴，应用该抗体早期预防对缺乏母源抗体的雏鸡可提高被动免疫水平，早期应用0.5mL／只的剂量可起到预防、紧急预防作用，治疗幼鸡总有效率为91％以上；王永山等制备了抗IBD、ND的二联抗体，进行临床对照试验，结果是治疗组的保护率71％，死亡率为29％，对照组病死率70％，治疗组和对照组的差异十分显著；张英等制备抗小鹅瘟卵黄抗体，推广预防和治疗、紧急治疗，预防保护率90.8％，治愈率95.2％。此外，抗鸡新城疫病、抗鸭病毒性肝炎病、抗番鸭细小病毒病、抗鸡减蛋综合征病、抗鸡脑脊髓炎病、抗鸡病毒性关节炎抗体病、抗鸡传染性喉气管炎病、抗鸡大肠杆菌病、抗鸡沙门氏菌病等高免蛋黄抗体已有较多报道。在改善家禽生产性能方面，有学者对商品肉鸡的试验结果表明，喂以不同浓度（25 mg／kg－250 mg／kg）的抗尿素酶抗体的鸡，在体增重与饲料转化率方面有所改善。给鸡饲喂抗抗胆囊收缩素（CCK）抗体，饲料转化率明显改善，同时还可改善 因采食含生大豆粉饲料所引起的鸡采食量下降和饲料转化率降低等不利影响。毛宁等制备了抗CH-108、SG-001（嗜水气单胞菌A.hydrophila），PC-007（温和气单胞菌A.sobrio），FC-007（豚鼠气单胞菌A.Caviae）四株菌的四联高免卵黄抗体，给试验病鳖注射也有一定效果。
在提倡健康养殖和保护动物健康，保障畜禽产品安全，保障人类健康的今天，蛋黄抗体具有良好的开发和应用前景。对于蛋黄抗体以后的研究开发，主要应当着力解决抗原制备（敏感性、免疫方法）、高免蛋的生产（抗体滴度）、抗体提取与纯化（精制），以更好的服务于生产。
关键词：蛋黄抗体 制备 应用
1、蛋黄抗体（IgY）概述
1·1蛋黄抗体的概念
蛋黄抗体（Egg yolk antibodies,eyAb）是指蛋黄中存在的抗体，也称蛋黄免疫球蛋白（Egg yolk immunogbulins, eylg）。科学家在鸟类的血液循环里发现三种免疫球蛋白（IgG、IgA与IgM），母鸡在细胞分裂产蛋的过程中，会将其免疫球蛋白转移至鸡蛋，母鸡血浆中之IgA与IgM，会在输卵管中与其他的蛋白质结合而构成鸡蛋蛋白的部分。比较特别的是，在成熟期中，血清IgG会经由蛋黄薄膜转移到蛋黄中，蛋黄的IgG基于与哺乳类的IgG在分子量、等电点、细胞膜上Fc受质的键结等结构上存在着相异点而被特定称为IgY。鸡卵黄免疫球蛋白G抗体是一种7S免疫球蛋白，与哺乳动物IgG略有不同。该蛋白质分子量约为180kDa，含两个亚单位，即67～70kDa的重链和22～30kDa的轻链，存在于免疫后母鸡的卵黄中。早在60年代，科学家们就发现鸡卵黄中存在IgG抗体，其含量与鸡血清相似甚至更高，但一直未引起足够的重视。显然是由于很难将IgG抗体从丰富的卵黄脂质中分离出来，使得鸡蛋作为抗体来源的研究受到限制。直到80年代初，Polson和Jensenius相继建立了有效且相对简便的聚乙二醇（PEG）提取法和硫酸葡聚糖提取法后，有关这方面的研究才比较系统和深入。eyIg 的功能与哺乳动物IgG类似，但是，二者之间又存在许多不同，LeslieandB.ClemIgy（1969）提出以IgY表示。EyIg是母禽血清IgG主动转运到蛋黄中富积形成的，其浓度高于血清IgG浓度。(E.Orlans,1967)，理化性质上与禽血清IgG相似。
在兽医领域，人们长期以来是从高免动物（如兔、鸡、牛、猪、羊、小鼠、大鼠、豚鼠等）的血清、初乳或单壳隆抗体分离IgG。近十几年来，国内外学者就卵黄抗体的研究和开发作了许多工作，证明了免疫鸡的蛋是提供特异性IgG抗体最方便、最廉价的来源。Jcnscncus等（1981）报道认为，一只母鸡在一个月中生产制备的卵黄抗体相当于500ml血清抗体。Bar-Joseph（1980）实验证明每ml卵黄含有3-25mgIgG，也就是说每个蛋可提供40-500mgIgG。当然，免疫后卵黄抗体水平高低主要取决于抗原的种类、浓度、免疫的途径和加强免疫的时间等。母鸡通过两种途径将其全部同型抗体转移到鸡蛋：首先是循环血液中的血浆抗体转移到成熟的卵泡中，这种选择性转移到卵巢滤泡的α-球蛋白主要是IgG。第二个途径是在输卵管中进行，抗体与在这里分泌的卵蛋白一起混入到鸡蛋白，而在蛋白中发现的免疫球蛋白主要是IgM和IgA，但不含IgG。Losch（1986）证明了yIgG和卵黄抗体对酸和温度具有一定抵抗力。当卵黄抗体1∶20稀释与0.1mol/1HCl作用2h，IgG浓度减少40%，抗体效价从log29降到log26。当与1mol/1HCl作用30min时，IgG活性降到log21；作用60min，IgG活性才完全消失。试验还证明将卵黄置于沸水中煮10min，yIgG和卵黄抗体活性降为零，煮6min几乎对卵黄中心的yIgG和卵黄抗体没有影响。