摘 要：将玉屏风散、 十全大补汤、 六味地黄丸三个中药复方散剂分别按1%剂量添加到科宝快大型白鸡日粮中， 于雏鸡14日龄， 按0.5 ml/只剂量肩部肌肉注射鸡新城疫灭活油乳剂疫苗， 即日起饲喂上述饲料， 并按40 mg/kg剂量胸肌注射环磷酰胺，每天1次， 连续3天； 免疫后第10天、 20天、 30天采血检测鸡新城疫HI抗体效价，观测鸡增重情况，免疫后第15天、 25天检测血清总蛋白含量。实验结果表明，玉屏风散、六味地黄丸能显著提高鸡新城疫HI抗体效价（P<0.05），十全大补汤的作用不明显；玉屏风散、十全大补汤能显著增加肉鸡体重（P<0.05），六味地黄丸的作用不明显，实验组鸡死亡率均降低；玉屏风散、十全大补汤能显著提高血清总蛋白含量（P<0.05），六味地黄丸的作用不明显。
关键词：中药复方散剂；鸡新城疫；灭活油乳剂疫苗；免疫效果
长期以来，一些常见鸡传染病给养鸡业带来了巨大的经济损失，鸡新城疫(ND)即是主要传染病之一，由于鸡新城疫的发病率与死亡率都比较高，目前也无特效药物治疗，主要通过接种ND疫苗来预防。当前许多研究报道了运用中草药预防与治疗各种畜禽疾病，以促生长为主的中草药饲料添加剂，以及中草药作为免疫佐剂，与畜禽疫苗（特别是禽用疫苗）同时使用，增强疫苗的免疫效果，提高动物机体抗病能力和生产能力。相关研究文献有中草药复方制剂、单味中草药、中草药提取浓缩物及中药单体对机体细胞免疫、体液免疫、免疫器官及机体生长状况的影响。笔者从临床应用角度出发，研究经典中药复方散剂对雏鸡体液抗体水平及肉鸡生长的影响，为兽用中药的研制、开发、利用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验动物1日龄科宝快大型父母代公雏鸡苗，购于广东从化科宝祖代鸡苗厂。
1.1.2 鸡新城疫灭活油乳剂疫苗购于华南农业大学实验兽药厂，批号：20020610
1.1.3 试验中药99.5%人参皂甙，批号20010910，华南农业大学兽医学院中兽医教研室提供99.5%海藻多糖，批号20010812，华南农业大学兽医学院中兽医教研室提供。
1.1.4 注射用环磷酰胺（200 mg/瓶）上海华联制药有限公司，批号020511。
1.1.5鸡新城疫标准抗原由华南农业大学实验兽药厂提供，批号00220606。
1.1.6红细胞悬液由华南农业大学实验兽药厂提供。
1.2方法
1.2.1动物分组1日龄科宝快大型父母代公雏鸡苗120只，分笼饲养（40只/笼），至14日龄时，选取健康小鸡80只，按体重梯度，均匀地分成4个组，1、2、3组为实验组，4组为对照组。按40 mg/kg剂量给实验鸡胸肌注射环磷酰胺，每天1次，连续3天，制造动物免疫抑制模型；同时每只鸡肩部肌肉注射鸡新城疫灭活油乳剂疫苗0.5 ｍl。
1.2.2中药复方添加剂配制从广州清平百草药行购买中药材， 鉴定后粉碎（60目），并按照比例组方。玉屏风散：黄芪∶白术∶防风为3∶2∶1； 十全大补汤： 党参∶白术∶茯苓∶甘草∶熟地∶白芍∶当归∶川芎∶黄芪∶肉桂为10∶7∶7∶3∶6∶8∶8∶3∶6∶2；六味地黄丸：熟地∶山萸肉∶山药∶茯苓∶泽泻∶牡丹皮为6∶5∶5∶7∶4∶3。各中药复方散剂按上述比例组方后，以1%添加量加入到鸡日粮中，用混匀机充分混匀后，从雏鸡14日龄分组时开始分别饲喂实验鸡1、2、3组，至实验结束，4组鸡日粮中不添加中药，作为对照组。
1.2.3血清的制备及ND-HI抗体检测分别在小鸡注射油苗后10、20、30 d时，用2.5 ml一次性注射器心脏（酒精棉球消毒处理）采血0.5 ｍl，置1.5 ml锥形塑料离心管中，室温静置1~2 h，待血清析出。少数未析出血清的，即以2 000 r/min 离心4~5 min至分离血清后，一起置4℃冰箱冷藏备用。用常规鸡新城疫β-微量血凝抑制试验(ND-HI)法检测ND－HI抗体效价。
1.2.4血清总蛋白测定方法在雏鸡注射油苗后第15、25天，按照1.2.3项方法制备血清，并根据总蛋白试剂盒使用说明书，用半自动生化仪器检测（UV-UIS，NIOMERIEUX公司）。
1.2.5雏鸡体重测定在雏鸡注射油苗后第10、20、30天，逐只称重，并记录肉鸡死亡情况。1.2.6结果统计所有实验数据用SPSS英文软件进行统计，再进行t检验其显著性。
2实验结果
2.1中药复方散剂对新城疫HI抗体效价的影响
结果见表1。免疫后三次抗体效价结果显示，六味地黄丸组20、30 d时，能显著提高ND－HI抗体效价（P<0.05）；玉屏风散实验组能明显提高ND－HI抗体效价（P<0.05），十全大补汤组效果不明显。
表1 中药复方散剂对新城疫HI抗体效价的影响（略）
2.2中药复方散剂对实验鸡生长情况的影响
结果见表2。三次体重测定结果显示，所有试验组鸡体重均大于对照组，其中玉屏风散组在第20、30天时结果显著高于对照组（P<0.01）；十全大补汤组在第20天时结果差异显著（P<0.05）；其余时间结果差异不显著（P>0.05）；在实验结束后，中药复方散剂组1、2、3和对照组鸡死亡数分别是1、2、1、4只。
表2 中药复方散剂对实验鸡体重的影响(略)
2.3 中药复方散剂对实验鸡血清总蛋白水平的影响
结果见表3。免疫后第15天、25天血清总蛋白含量，玉屏风散组2次均高于对照组，其中在25天时有极显著性差异（P<0.01）；六味地黄丸组效果差异不显著（P>0.05）；十全大补汤组在第25天时效果显著（P<0.05）。
表3中药复方散剂对实验鸡血清总蛋白水平的影响(略)
3讨论 本实验中所选用的中药复方均是经典补益类，其中玉屏风散是扶正固本方的代表方，十全大补汤是补气益血方的代表方，六味地黄丸是滋阴补肾方的代表方。其中各方中不同中药比例均经查阅相关资料后确定的。
免疫后三次新城疫HI抗体效价测定结果显示，六味地黄丸（散剂）能显著提高ND－HI抗体效价，玉屏风散作用比较明显，十全大补汤未显示出免疫增强作用，比较三方发现六味地黄丸效果最理想。
实验鸡三次体重测定结果显示，玉屏风散能极显著或显著增加肉鸡体重，十全大补汤能显著增加肉鸡体重，六味地黄丸效果不显著（P>0.05）。在30天实验期间，三个中药实验组分别死亡1、2、1只鸡，而对照组共死亡4只鸡。实验鸡血清总蛋白水平测定结果显示，在免疫后25天，玉屏风散能极显著提高血清总蛋白水平，十全大补汤能显著提高血清总蛋白水平，其余作用不显著（P>0.05）。与以上中药增重效果结果比较发现，中药复方增加肉鸡体重作用与提高血清总蛋白水平有相关性。
实验结果显示，本实验所用经典复方均能不同程度地提高机体液抗体水平，促进肉鸡生长，提高血清总蛋白量，降低雏鸡死亡率。甄彦群等研究玉屏风散作用机理发现，加味玉屏风散可促进淋巴细胞DNA合成，加快分裂增殖，并能延缓细胞衰老。董发明等利用中药苍术与黄芪自制苍芪散饲喂鸡，结果实验组的血清ND－HI抗体效价均极显著高于对照组(P<0.01)。曹志然等研究发现十全大补汤可明显增强环磷酰胺和氢化可的松造成小鼠细胞免疫和体液免疫功能的降低。