4 精液的稀释、分装、运输和保存
4.1 精液的稀释
精液稀释的目的是扩大精液量,增加每次采精的可配母羊数,提高种公羊的利用率,还可供给精子营养,增强精子活力,有利于精液的保存、运输和输精。
4.1.1 稀释液的配制:稀释液的配方选择易于抑制精子活动,减少能量消耗,延长精子寿命的弱酸性稀释液。
配方一:生理盐水稀释液:是用注射用生理盐水或经过过滤消毒的0.9%氯化钠溶液作稀释液。此种稀释液简单易行,稀释后的精液应在短时间内使用,是目前生产实践中最为常用的稀释液。但用这种稀释液稀释时,稀释的倍数不宜太高,一般以2倍以下为宜。
配方二:奶汁稀释液:奶汁先用7层纱布过滤后,再煮沸消毒10~15分钟,降至室温,去掉表面脂肪即可。这种稀释液稀释效果好,但稀释倍数不能太高,以3倍以下为宜。
配方三:葡萄糖卵黄稀释液:在100毫升蒸馏水中加葡萄糖3克、柠檬酸钠1.4克,溶解后过滤3~4次,蒸煮30分钟后灭菌,降至室温,再加新鲜卵黄(不要混入蛋白)20毫升,再加青霉素10万单位振荡溶解。这种稀释液有增加营养的作用,可作7倍以下的稀释。
4.1.2 精液的稀释倍数:要根据精子密度、活力而定稀释比例,稀释后的精液,每毫升有效精子数不少于7亿个。
4.1.3 精液稀释的操作步骤:根据镜检得出精子密度确定稀释倍数,根据稀释倍数计算出应加入的稀释液的量,用量杯量取应加的稀释液量。稀释前将两种液体置于同一温水中,然后将稀释液沿着精液瓶缓缓倒入,为使混合均匀可稍加摇动或反复倒动1~2次,稀释完毕后,立即进行活力镜检,并将镜检结果填人采精登记表。
4.1.4 精液稀释应注意的事项:稀释液温度与精液温度保持一致,在20℃~25℃室温和无菌条件下操作,精液稀释的倍数应根据精子密度而定,一般为1~3倍,稀释后的每毫升有效精子数不能低于7亿个。
4.2 精液的分装
将稀释好的精液根据各输精点的需要量分别装于2~5毫升小试管中,精液面距试管口不少于0.5~1.0毫升,然后用玻璃纸和胶圈将试管口扎好,在室温下自然降温。分装后贴上标签,标签上注明精液采出的日期、时间、活力、密度、公羊的品种。
4.3 精液的运输
在近距离运送精液时,不必进行降温,将装有精液的集精瓶或小试管口封严,用棉花包好放入保温瓶中即可。远距离运输时,可用直接降温法降温。运输精液时要防止剧烈震动,降温或升温都要缓慢进行,每次输送的精液都要注明公羊号、采精时间、精液量和精液品质。
4.4 精液的保存
4.4.1 常温保存:精液稀释后,保存在20℃以下的室温环境中。在这种条件下,精子运动明显减弱,可在一定限度内延长精子存活时间。常温保存只能保存1天。
4.4.2 低温保存:在常温保存的基础上,温度进一步缓慢降至0℃~5℃之间。可用直接降温法,将精液装入小试管内,外面包以棉花,再装入塑料袋内,直接放入装有冰块的广口保温瓶或保温箱中,使温度逐渐降至2℃~4℃。低温下保存的有效时间为2~3天。
4.4.3 冷冻保存:精液的冷冻保存要求的技术、环境和设备条件较严格,操作过程也比较复杂,这里不加详述。
5 发情鉴定
适时配种是提高羊人工授精受胎率的关键措施之一,母羊发情的主要表现:食欲减退、兴奋不安、嘶鸣、爬跨其他羊或接受其他羊爬跨而静立不动;阴门红肿,频频排尿而流出透明的黏液;用试情公羊与母羊接触(隔着试情架),母羊表现温驯,并将后躯转向公羊,阴门肿胀;用阴道开膣器插入阴道,使之开张,发情盛期的母羊阴道潮红、润滑,子宫颈口开张,分泌的黏液呈豆花样。
6 输精
6.1 输精前的准备
6.1.1 人员的准备:输精人员应穿工作服,用肥皂水洗手擦干,用75%酒精消毒后,再用生理盐水冲洗。
6.1.2 输精器械的准备:把洗涤好的开膣器、输精枪、镊子用纱布包好,一起用高压锅蒸汽消毒。
6.1.3 母羊的准备:对发情母羊进行鉴定及健康检查后,才能输精,母羊输精前,应对外阴部进行清洗,以1/3000新洁尔灭溶液或酒精棉球进行擦拭消毒,待干燥后再用生理盐水棉球擦拭。
6.1.4 精液的准备:将精液置于35℃的温水中升温5~10分钟后,轻轻摇匀,做显微镜检查,达不到输精要求的不能用于配种。
6.2 输精方法
将用生理盐水湿润后的开膣器插入阴道深部触及子宫颈后,稍向后拉,以使子宫颈处于正常位置之后轻轻转动开膣器90度,打开开膣器,开张度在不影响观察子宫的情况下开张的愈小愈好(2厘米),否则易引起母羊努责,不仅不易找到子宫颈,而且不利于深部输精。输精枪应慢慢插入到子宫颈内0.5~1.0厘米处,插入到位后应缩小开膣器开张度,并向外拉出1/3,然后将精液缓缓注入。输精完毕后,让羊保持原姿势片刻,放开母羊,原地站立5~10分钟,再将羊赶走。
6.3 输精次数和输精量
输精次数:母羊1个情期应输精2次,发现发情时输精1次,间隔8~10个小时应进行第2次输精。输精量:每头份的输精量,原精液为0.05~0.10毫升,稀释后精液应为0.1~0.2毫升。
6.4 输精时应注意的问题
输精人员要严格遵守操作规程,输精员输精时应切记做到深部、慢插、轻注、稍停。对个别阴道狭窄的青年母羊,开膣器无法充分打开,很难找到子宫颈口,可采用阴道内输精,但输精量需增加1倍。输精后立即做好母羊配种记录。每输完一只羊要对输精器、开膣器及时清洗消毒后才能重复使用,有条件的建议用一次性器具。


