奶牛乳房炎是危害奶牛养殖业最常见的疾病之一，不仅影响奶牛产奶量，造成严重的经济损失，而且影响乳的品质。乳房炎病牛乳汁中的大量病原微生物及其产生的毒素或经治疗后产生的大量抗生素残留，可直接危害人类健康。目前，全世界约有2.2亿头奶牛，其中约有1/3的奶牛患有各种类型乳房炎，每年因乳房炎造成的损失高达350亿美元，仅美国的损失就达20亿美元[1-2]。据Lund T F等[3]报道，在丹麦，平均每头奶牛每年的损失估计超过200美元。我国现有奶牛1 063万头左右，每年因乳房炎所造成的经济损失超过了3.16亿元[4]。目前国内治疗奶牛乳房炎以抗生素为主，但是由于抗生素的滥用，致使病原菌抗药性耐药性增强，且药物残留等问题一直是困扰兽医工作人员的难题，并且抗生素对细菌产生的内毒素无清除作用，对受损伤的乳腺组织修复作用也不大，随着人们对食品安全要求的不断提高和国家对乳制品质量更严格的要求，临床治疗乳房炎常用的抗生素将逐渐被限用或禁用，因此寻求高效、绿色、简便易行的防治奶牛乳房炎方法一直是兽医科技人员研究热点[5]；“乳源康”是中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所和兰州正丰制药有限公司在多年研究基础上，结合国家攻关子课题共同开发完成的新型中草药注射剂产品，具有高效、安全、低毒、吸收快、使用方便(乳室注入)、疗程短、复发率低、无残留等优点。
1 材料与方法
1.1 实验动物及药品试剂
1.1.1 隐性乳房炎病例 在兰州伏龙坪奶牛场、兰州古城坪奶牛场、兰州五泉奶牛场、兰州段家滩奶牛场、白银区奶牛场、七里河区奶牛场、城关区奶牛场进行疾病普查时，用隐性乳房炎诊断试剂(LMT)检测出阳性但尚未表现出临床症状的病牛即患隐性乳房炎病牛，共4 031头。
1.1.2 临床型乳房炎病例 病例来源与隐性乳房炎病例一样来自相同的奶牛场；临床检查乳房有红、肿、热、痛等症状及奶质有酸败、水样、血丝、沉淀、脓汁、异味等变性的，并且用隐性乳房炎诊断试剂(LMT)检测为阳性病乳牛1 914头次，其中“乳源康”治疗组共1 638头次、急性1 184头次、亚急性396头次、慢性58头次，青、链霉素治疗组共276头次，其中急性178头次、亚急性56头次、慢性42头次。
1.1.3 药物 “乳源康”，批准文号为甘兽药字(2003)Z008567(规格100 mL/瓶，主要成分为丹参、黄连、连翘、双花等的提取分离物)由兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程重点实验室提供；青霉素钠(或钾)(80万单位)和硫酸链霉素(100万单位)，哈尔滨制药六厂生产。
1.1.4 培养基及诊断试剂 70 mL/L羊血琼脂平皿和普通肉汤由兰州荣昌生化试剂厂生产；隐性乳房炎诊断试剂(LMT)为液体制剂，由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所生产。
1.2 方法
1.2.1 隐性乳房炎的诊断及判定标准 隐性乳房炎因患牛乳房临床无任何肉眼可见病变，且奶质(眼观、静置)与正常奶样也无明显的差异，故其诊断主要采取特殊的表面活性剂检测乳汁中体细胞数的多少并依之判定病情的轻重，其判定标准为乳汁中体细胞数(SCC)小于50万个/mL为健康乳(－)，SCC在50万～100万个/mL为阳性乳(＋)，SCC大于100万个/mL为强阳性乳(＋＋)。检测时取LMT诊断液加3倍的蒸馏水配成检测液，现场取检测液2 mL加等量待检奶于特定的托盘中，轻轻摇动3 s～5 s，以出现沉淀或混浊现象的程度作出定性判断。若不见沉淀或混浊或停止摇动混浊现象消散不见判定为阴性即为健康乳(－)，若摇动时沉淀积于托盘中间判定为阳性(＋)，若沉淀出现多甚至胶黏摇不动判定为强阳性(＋＋～＋＋＋)。
1.2.2 给药量及给药方法 “乳源康”治疗组：每次每个乳区用“乳源康”50 mL(视病情轻重用量在20 mL～50 mL/乳区)，尽量完全挤尽病牛乳房中奶汁后，750 mL/L酒精棉球消毒乳头后注入乳室，上、下午各1次，连续3 d～6 d；青霉素、链霉素治疗组：每次每个乳区用青霉素钠(或钾)80万单位，硫酸链霉素100万单位，用注射用水或生理盐水50 mL溶解，挤尽奶后用750 mL/L酒精棉球消毒乳头后注入乳室，上、下午各1次，连续4d～7 d。上述药液配好后加热至38 ℃时给药，给药后按摩乳房5 min左右，尽量使药物在乳房内分布均匀，促进吸收。
1.2.3 临床乳房炎诊断及疗效判定方法 临床检查乳房有红、肿、热、痛等症状及奶质有酸败、水样、血丝、沉淀、脓汁、异味等等指标来判定是否患病；依发病时间的长短分为急性、亚急性和慢性乳房炎，依发病次数分初发和复发。疗效判定：痊愈，临床症状消失，乳汁恢复正常，LMT检测乳汁中体细胞数(SCC)小于50万个/mL。有效，临床症状消失，乳汁恢复正常，LMT检测SCC在50万～100万个/mL之间。无效，临床症状不消褪甚至加重，乳汁仍有异常变化，LMT检测SCC大于100万个/mL。
1.2.4 奶样采集 乳源康治疗前后乳汁中细菌检查用。
1.2.4.1 奶样来源 奶样采自兰州伏龙坪奶牛场、兰州古城坪奶牛场患临床型乳房炎的奶牛36头，56个乳区治疗前后的奶样共计112份。
1.2.4.2 采样方法 先用温水后用750 mL/L酒精棉球檫试乳头及术者手指，挤出前两把奶废弃，然后用灭菌试管接取奶样5 mL～10 mL左右，用胶塞封口，注明牛号，采样的乳室及日期，立即送检。
1.2.4.3 细菌分离鉴定 奶样摇匀后，挑取3铂～5铂耳圈分别涂布于血琼脂平皿、却甫曼琼脂和麦康凯琼脂平皿上，同时接种肉汤一管(用作增菌培养)，均置 37 ℃温箱中培养 20 h～24 h后取出，挑选可疑菌落纯化，移入肉汤管和血斜面上。在血平皿上未长菌的奶样，用其增菌培养肉汤再接种一次，培养 48 h后，检查菌落以免漏检。培养 48 h后仍不长菌，且乳汁外观正常，即可认定无菌。挑选纯化的菌落在肉汤，斜面上生长后，取肉汤培养物涂片，革兰氏染色，镜检，最后根据细菌形态和特征，确定细菌种类。