国家三类新兽药——复合亚氯酸钠粉

国家三类新兽药复合亚氯酸钠粉

胡金花1   孙清莲2王成龙3 马振良4

新乡市康大消毒剂有限公司1  新乡动物卫生疾病预防控中心2

新乡市畜产品质量监测检验中心3 获嘉县农牧局4

复合亚氯酸钠粉为亚氯酸钠、酸及稳定剂等配制而成，2015年通过农业部审批获得国家三类新兽药证书（2015新兽药证字15号）。

本品属强氧化剂。加水活化后产生二氧化氯，能杀灭细菌、真菌和病毒等微生物，并能氧化水体中的亚价态物质及有机质达到改善水质的目的。

一、主要成分及其作用

本品为亚氯酸钠、酸及稳定剂等配制而成，在酸的活化作用下，亚氯酸钠在水溶液中发生歧化反应释放CLO2，含量按二氧化氯计算4.5%，由于在配方中添加了稳定剂，使产品在贮存过程中安全、稳定。

二、复合亚氯酸钠粉的产品特点

1.稳定性

新乡市康大消毒剂有限公司的固体二氧化氯属于一元包装，在有稳定剂的保护下在特定工艺下，将亚氯酸钠和酸混合，存放和运输中安全。

2.携带、使用方便

在使用时打开包装即可直接使用，临用时加水配制、活化，简便快捷，便于随身携带，有利于长途运输与贮存，消除了二元包装带来的不安全因素及给用户带来的不便，给用户带来了更大的方便性、实用性。

3.兽药质量新标准使复合亚氯酸钠粉的检测更科学

特别在质量标准的建立上，突破了复合亚氯酸钠粉活化后产生二氧化氯含量控制标准难以建立的难题，该标准集国家发布的二氧化氯固体释放剂的标准精髓，分析检测时利用产品加水活化后产生的二氧化氯与碘化钾和硫酸反应生成碘,根据其反应生成的碘与硫代硫酸钠定量反应，来定量测定二氧化氯的含量，结合产品特点，经过反复验证，得出了适合本产品的检验方法，检测技术和质量控制手段在行业内具有先进性。该标准获得中国兽药监察所复核，成为该产品的国家法定标准。

三、作用研究

（一）复合亚氯酸钠粉对H5N1亚型和H9N2亚型禽流感病毒的杀灭效果的临床试验

1.复合亚氯酸钠粉消毒剂对鸡胚的毒性试验

将复合亚氯酸钠粉按1:10的质量体积比，称取消毒剂，加入无菌生理盐水中，混匀后静置30分钟活化和稀释，以质量体积比1:10、1:20、1:40、1:80、1:100、1:1000倍稀释的复合亚氯酸钠粉消毒液分别接种10日龄SPF鸡胚，每个稀释度接种5枚鸡胚（0.1mL/胚），将接种的鸡胚置37℃温箱中培养96小时。24小时以内死亡的鸡胚去掉，记录鸡胚死亡情况。

2.复合亚氯酸钠粉消毒剂对病毒的杀灭率试验

配制108.25EID50/0.1mL H5N1亚型禽流感病毒悬液和108.5EID50/0.1mL H9N2亚型禽流感病毒悬液，分别与质量体积比为1:200、1:400、1:500、1:600、1:700、1:800、1:1000、1:2000倍稀释的复合亚氯酸钠粉消毒剂，按病毒液与消毒剂体积1:9混合，在20±1℃条件下作用10分钟后，与0.1M的硫代硫酸钠－生理盐水溶液作用，再用灭菌生理盐水做10倍递进稀释，做8个稀释度，每个稀释度接种5枚鸡胚（0.1mL/胚）。阴性对照组用灭菌生理盐水代替复合亚氯酸钠粉消毒液，同法处理；稀释液接种10日龄SPF鸡胚，每个稀释度接种5枚鸡胚（0.1mL/胚）。将接种的鸡胚置37℃温箱中培养，记录鸡胚死亡情况。24小时以内死亡的鸡胚去掉，24小时以后的死胚及时取出，至96小时全部取出，逐个取尿囊液做血凝(HA)试验，血凝阳性者判为鸡胚感染。

按照鸡胚感染的结果，按下列方程式计算试验组和对照组鸡胚感染的阳性率、样本含EID50与杀灭率。阳性率=血凝阳性鸡胚数/接种鸡胚数；样本含EID50量的对数=L-d(S-0.5)(L为最低稀释倍数的对数；d为稀释度间对数的差；S为各稀释列阳性率之和。

病毒杀灭率=（对照样本含EID50量-试验样本EID50量）/对照样本含EID50量×100%

3. 结果

复合亚氯酸钠粉消毒剂对鸡胚的毒性试验

由表1可知，将复合亚氯酸钠粉按1:10的质量体积比，称取消毒剂，加入无菌生理盐水中，混匀后静置30分钟活化、稀释，按照质量体积比1:10、1:20、1:40、1:80、1:100、1:1000倍稀释的复合亚氯酸钠粉消毒剂分别接种10日龄鸡胚，每个稀释度5枚鸡胚（0.1mL/胚），试验结果显示该消毒剂1:40以上稀释时对鸡胚无致病性。

表1 复合亚氯酸钠粉消毒剂对鸡胚的毒性试验

复合亚氯酸钠粉消毒剂的不同稀释倍数

1:10     1:20     1:40     1:80     1:100     1:1000

鸡胚死亡情况(枚)    5/5       1/5      0/5      0/5      0/5        0/5

注：分子为死亡胚数，分母为接胚数

复合亚氯酸钠粉消毒剂对禽流感病毒的杀灭作用

将质量体积比1:200、1:400、1:500、1:600、1:700、1:800、1:1000、1:2000倍稀释的复合亚氯酸钠粉消毒剂，分别与108.25EID50/0.1mL的H5亚型禽流感病毒悬液和108.5EID50/0.1mL H9亚型禽流感病毒(9:1)作用10分钟，不同稀释浓度的复合亚氯酸钠粉消毒剂杀灭病毒率结果见表2。

表2. 复合亚氯酸钠粉消毒剂对H5N1亚型和H9N2亚型禽流感病毒的杀灭率

不同浓度的复合亚氯酸钠粉消毒剂

1:200    1:400    1:500    1:600    1:700   1:800   1:1000   1:2000

对H5亚型病毒杀灭率  100%     100%     100%     100%     99.9%   99.99%  96.84%   82.22%

对H9亚型病毒杀灭率  100%      100%    100%     100%     100%    99.99%  99.99%   99.90%

4. 结论

采用Klein-Defors悬浮杀灭与感染试验方法，将复合亚氯酸钠粉消毒剂在不同稀释度下，分别与H5N1亚型禽流感病毒和H9N2亚型禽流感病毒（9:1）体外直接作用，以此检测复合亚氯酸钠粉消毒剂体外对禽流感病毒的杀灭效果。检测结果表明，与禽流感病毒作用10分钟后，1:200倍（即1升水中含有5克固体粉末状消毒剂）至1:600倍（即6升水中含有10克固体粉末状消毒剂）稀释的复合亚氯酸钠粉消毒剂对禽流感病毒的杀灭率为100%，有完全的杀灭病毒作用。

（二）复合亚氯酸钠粉消毒剂对口蹄疫病毒的杀灭效果的临床试验

1.病毒的制备和稀释

O型口蹄疫乳鼠组织毒（LD=10-8.0），用灭菌0.04mol/l的磷酸盐缓冲液（PH7.6）稀释成1：500倍病毒悬液，备用。

2.试验动物

日龄吮乳小白鼠（乳鼠），由中国农业科学院兰州兽医研究所实验动物场提供。

3.试验方法

安全性试验   用去离子水将复合亚氯酸钠粉消毒剂1：50、1：100、1：200倍稀释，分别注射4日龄乳鼠，每只乳鼠背部皮下注射0.2ml消毒液稀释液，每组注射5只；设阴性对照，阴性对照每组5只乳猪，每只乳鼠背部皮下注射0.2ml灭菌去离子水。注射后连续观察72小时。每组试验重复4次。

杀灭口蹄疫病毒效果的试验   用灭菌去离子水将复合亚氯酸钠粉消毒剂做1：150、1：200、1：300、1：400、1：500稀释，分别与1：500倍稀释的口蹄疫病毒等量混合，室温作用30min后，注射4日龄乳鼠，每组注射5只，每只乳鼠背部皮下注射病毒-消毒液混合液0.2ml；设病毒对照（阳性对照），病毒对照每组5只乳鼠，每只乳鼠背部皮下注射0.2ml1：1000倍稀释的病毒液；设健康对照（空白），健康对照每组5只乳鼠，每只乳鼠背部皮下注射0.2ml去离子水。注射后连续观察7天。每组试验重复5次。

4.判定标准

安全性判定标准：乳鼠不死亡或无不良反应，判为安全，反之为不安全。

杀灭病毒效果判定标准    病毒对照组乳鼠在接种病毒后发病死亡，并从乳鼠体内检测到口蹄疫病毒，试验成立；试验组乳鼠在观察期间无异常表现，全部健活，判定消毒剂有效；试验组有乳鼠死亡，并从乳鼠体内检测到口蹄疫病毒，判定该浓度下消毒剂无效。

5.试验结果

复合亚氯酸钠粉消毒剂在1：50倍及以上稀释时，对实验动物安全。结果见表3。

表3：消毒剂对动物的安全性测定

消毒剂           接种乳鼠数（只）             死亡比例                   结果判定

浓  度                                 （死亡数/试验动物总数）

1：50                20                        0/20                        安全

1：100               20                        0/20                        安全

1：200               20                        0/20                        安全

阴性对照             20                        0/20                        对照成立

复合亚氯酸钠粉消毒剂对口蹄疫病毒杀灭效果测定，结果见表4。

表4：消毒剂对口蹄疫病毒杀灭效果的测定

消毒温度        消毒剂       接种乳鼠数（只）          死亡比例           效果判定

作用时间        终浓度                          （死亡数/试验动物总数）

1：300           25                      0/25               有效

1：400           25                      0/25               有效

1：600           25                      0/25               有效

16-25℃        1：800           25                      20/25              无效

1：1000          25                      25/25              无效

阳性对照         25                      25/25             对照成立

健康对照         25                      0/25              对照成立

6.试验结论

由此得出，复合亚氯酸钠粉消毒剂能杀灭口蹄疫病毒。复合亚氯酸钠粉消毒剂100%杀灭口蹄疫病毒最高稀释度为1：600。

（三）复合亚氯酸钠粉现场消毒试验

自然菌表面现场消毒试验

1.验场地要求   消毒试验需分别在一个月内未使用过任何消毒剂的两个畜禽饲养场的两个以上动物圈舍进行，圈舍面积平均不小于50m2。消毒前对畜禽圈舍地面以自来水进行冲洗，1小时后进入正式试验阶段。

2.试验分组    消毒剂试验组：设高、中(最低有效杀菌浓度)、低三个浓度试验组。 消毒剂对照组：选择二氯异氰脲酸钠为对照消毒剂，按推荐使用浓度消毒，同时进行杀菌效力对比试验。空白试验组：不施消毒剂试验组。

3.采样方法

消毒前与消毒后一小时内的三个时相点分别在畜禽圈舍地面、墙壁、饮水器、食槽等不同部位采样，取样时将棉拭子用中和剂浸润后，在面积为5×5cm2的地面或其他物体表面横直各用力擦拭10次，并不断转换拭子擦拭面，将拭子棉花端剪入采样液内用力振摇100次，将菌洗脱，洗液以生理盐水稀释，在琼脂平皿中培养作活菌计数。

4.结果分析

杀菌率计算：杀菌率=（消毒前活菌数－消毒后活菌数）/消毒前活菌数 ×100%

5. 结果

复合亚氯酸钠粉对圈舍不同部位细菌的杀菌率   当作用时间为60min，使用浓度为1:1000的复合亚氯酸钠粉的对饮水器、食槽、地面、墙壁的杀菌率分别为51.43%、87.74%、95.73%；使用浓度为1：500、1：250时的复合亚氯酸钠粉消毒剂对圈舍现场消毒的杀菌效果以及二氯异氰脲酸钠的现场消毒效果见表5和表6。

表5不同浓度复合亚氯酸钠粉对圈舍不同部位细菌的杀菌率（单位：%）

表6 不同浓度二氯异氰脲酸钠对圈舍不同部位细菌的杀菌率（单位：%）

当复合亚氯酸钠粉消毒剂使用浓度为1：500，作用时间为60min时，复合亚氯酸钠粉消毒剂对圈舍的饮水器、食槽、地面、墙壁的细菌杀灭率达到70%以上。复合亚氯酸钠粉消毒剂使用浓度为1:250，作用时间为60min时，复合亚氯酸钠粉消毒剂对圈舍的饮水器、食槽、地面、墙壁的细菌杀灭率达到80%以上。二氯异氰脲酸钠消毒剂也有类似的杀菌效果。

新乡市康大消毒剂有限公司还研究了复合亚氯酸钠粉消毒剂对几种病原菌的杀灭效果试验，结果显示：当室温20℃，复合亚氯酸钠粉消毒剂实际使用浓度为1:500，消毒剂作用时间为20min时，该消毒剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌四种测试致病菌，杀菌率达到100%。

（四）在水产养殖方面的应用研究

1.复合亚氯酸钠粉对水产养殖动物几种主要病原菌：柱状嗜纤维菌、嗜水气单胞菌、迟缓爱德华氏菌、鳗弧菌的杀灭效果是很好的。当水温20℃、消毒作用时间为20min时，0.2mg/L的复合亚氯酸钠粉即可杀灭80%的嗜水气单胞菌、柱状黄杆菌、迟缓爱德华氏菌和鳗弧菌，全部杀灭细菌的浓度在1.6mg/L-3.13mg/L；在水温20℃，水体PH6.5-8.5、色度0-50度的范围内，2.0mg/L的复合亚氯酸钠粉作用10min即可全部杀灭水中的嗜水气单胞菌、柱状黄杆菌、迟缓爱德华氏菌和鳗弧菌。在10-30℃水温条件下时，2.0mg/L的复合亚氯酸钠粉作用10min即可全部杀灭水中的嗜水气单胞菌、柱状黄杆菌、迟缓爱德华氏菌和鳗弧菌。

2.毒理研究

在水产养殖中进行水体消毒时, 复合亚氯酸钠粉的使用浓度0.2mg/L会引起水体枝角类（裸腹溞、隆线溞，蚤状溞和大型溞）的死亡。草鱼、鲢、鳙、鲫鱼苗，克氏原螯虾、日本沼虾虾苗对复合亚氯酸

钠粉的安全浓度在2.93mg/L -7.42mg/L、鱼苗、鱼种进行浸泡消毒时，使用浓度为0.8g-1.6g/m3，各种鱼类、虾的使用浓度为0.20g-0.30g/m3，鱼苗和虾苗是安全的。

四、复合亚氯酸钠粉的正确应用

按照下表中用途计算用量，配制溶液时，先将10倍药品重量的水称量于容器中，再将药品缓缓倒入水中，搅拌溶解均匀，静置活化30分钟，待溶液变成深黄色，加水稀释至使用浓度。用于养殖水体和鱼虾时将活化后溶液加水稀释2000倍后全池均匀泼洒；用于畜禽圈舍及器具时将活化后溶液按下表中说明加水至稀释浓度即可（表中用量均以本品计）。

*根据鱼体的反应灵活掌控浸泡时间。

五、注意事项

1.禁止将药品先放入容器中，再将水倒入容器内。

2. 避免与强还原剂和酸接触；不得使用金属器具配制或盛放溶液。

3.包装破损严禁贮运。勿与酸性物共贮共运，勿受潮。

4.本品应现配现用，开启后的包装应安全存放，以免造成人、畜误服。

5.使用后的废弃包装勿乱扔，要妥善处理。

6.在水产养殖中进行水体消毒时,本品对水环境有一定影响，应严格按说明书中用法用量使用。

7.不可与其他消毒剂混合使用。